Unfortunately this product is not available in your region.
Some content on this page is not available in English and displayed by default in the language currently available.

Реакционная смесь для кПЦР all-in-one, 2x (с добавлением dsGreen, ROX, UDG)

Смесь для кПЦР all-in-one подходит для точного определения содержания ДНК матрицы в пробе и может применяться для определения копийности и уровня экспрессии генов, генотипирования и др. Готовая 2-х кратная реакционная смесь содержит все необходимые компоненты для проведения количественной ПЦР, ее состав оптимизирован для получения идеальных результатов с минимальным значением порогового цикла и высоким уровнем отношения сигнал/фон. Смесь all-in-one - лучшее решение для большинства задач с минимальными затратами времени. Полимераза с технологией "горячего старта" предотвращает неспецифическую амплификацию, а урацил-ДНК-гликозилаза исключает кросс-контаминацию и получение ложноположительных результатов. Для детекции используется интеркалирующий краситель dsGreen в присутствии референсного красителя ROX* - оба реагента производства Lumiprobe и уже зарекомендовали себя на рынке флуоресцентных красителей. Концентрация ROX была специально оптимизирована для работы на большинстве real-time амплификаторов, доступных на рынке. Для постановки реакции просто смешайте в пробирке смесь для кПЦР all-in-one, праймеры, ДНК и воду; 1 мл реакционной смеси рассчитан на проведение 100 реакций объёмом 20 мкл.

Формат ПЦР: количественная ПЦР (ПЦР-РВ) с интеркалирующим красителем

Состав реакционной смеси: HS Taq ДНК-полимераза, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (включая dUTP), урацил-ДНК-гликозилаза (UDG), ПЦР-буфер (содержит Mg2+), интеркалирующий краситель dsGreen, референсный краситель ROX

Совместимость с оборудованием: совместим с большинством real-time амплификаторов, в том числе производства Applied Biosystems (7300, 7500, 7500 Fast, 7900HT, QuantStudio 12k Flex,QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6 Flex, QuantStudio 7, StepOne, StepOnePlus, ViiA 7 System), Bio-Rad (CFX384, CFX 96, iQ5), Roche (LC 480), Stratagene (MX3000P, MX3005P, MX4000) и др.

Ключевые характеристики смеси:

  • Для постановки реакции в смесь необходимо добавить только образец ДНК, праймеры и воду, что значительно экономит время на постановку реакции.
  • Для анализа в режиме реального времени используется интеркалирующий флуоресцентный краситель dsGreen (Lumiprobe) в присутствии референсного красителя ROX.
  • В состав смеси входят урацил-ДНК-гликозилаза (UDG) и dUTP для предотвращения кросс-контаминации продуктами реакции.**
  • Подходит для ПЦР фрагментов длиной до 3 тыс. п.о., не более 70% GC, не требующих высокоточной амплификации.
  • В качестве матрицы может использоваться геномная, вирусная, плазмидная ДНК и др.
  • Формат готовой реакционной смеси снижает риск контаминации образцов.
  • В состав реакционной смеси входит Taq-полимераза с технологией "горячего старта" (Hot Start). Используемая HS Taq ДНК-полимераза представляет собой комплекс моноклональных антител с ферментом. Прогрев образца в первом цикле ПЦР приводит к инактивации антител в составе комплекса и активирует фермент. Технология "горячего старта" позволяет предотвратить неспецифическую амплификацию и образование димеров праймеров.
  • HS Taq ДНК-полимераза обладает 5'-3' полимеразной, 5'-3' экзонуклеазной, аденилтрансферазной активностью.

*мы также предлагаем готовую реакционную смесь для кПЦР, не содержащую ROX - All-in-one no ROX qPCR master mix.

**при полной замене dTTP на dUTP в реакционной смеси, все ПЦР-ампликоны содержат вместо тимина (Т) урацил (U). Урацил-ДНК-гликозилаза отщепляет основания урацила от сахарофосфатного остова одно- и двуцепочечной ДНК, но не воздействует на тимин-содержащую ДНК. Апиримидиновые сайты блокируют работу ДНК-полимеразы и подвержены гидролитическому расщеплению при повышенной температуре. Для работы фермента необходимо включить в протокол стадию предобработки образца в виде дополнительного цикла ПЦР (5 мин, 50 С). Последующая температурная инактивация урацил-ДНК-гликозилазы, а также разрушение ампликонов с выщепленным урацилом осуществляется на стадии предварительной денатурации ДНК.

Таблица подбора мастер микса для ПЦР

Реакционные смеси для количественной ПЦР (ПЦР-РВ)
Название смеси dsGreen ROX UDG, dUTP Применение
ProbeMaster ROX+UDG qPCR mix Cat.# •5214 кПЦР с ДНК-зондами или интеркалирующим красителем
ProbeMaster ROX qPCR mix Cat.# •5114
ProbeMaster dsGreen+ROX qPCR mix Cat.# •5514 кПЦР с интеркалирующим красителем
All-in-one qPCR master mix Cat.# •5414
All-in-one no ROX qPCR master mix Cat.# •5314
Реакционная смесь для стандартной ПЦР
Basic PCR master mix Cat.# •5024 ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза, содержит краситель для нанесения на гель
Универсальная реакционная смесь
PCR/qPCR master mix Cat.# •5534 кПЦР с ДНК-зондами/интеркалирующим красителем или стандартная ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза

Customers also purchased with this product

dsSafe Nucleic Acid Gel Staining Solution, 10000×

Fluorescent dye for DNA and RNA gel visualization, the best and safer alternative to ethidium bromide.

dsGreen for Real-Time PCR, 100×

Fluorescent dye for detection of amplification in real-time PCR in a ready-to-use 100× stock solution for adding to the master mix.

Pico488 dsDNA Quantification Reagent, 200x

Pico488 is a dye for precise fluorescence based quantification of dsDNA in the presence of RNA, ssDNA, and other impurities. The dye exhibits bright fluorescence in the fluorescein channel, which provides a linear response to DNA concentration within the range of low pg/mL to high ng/mL.

Общие свойства

MSDS: Download
Product specifications
Your item has been added. View your cart or proceed to checkout
The count of items is incorrect.